Stammion und Aktivität der Cellulase
Stammauswahl von Zellulase
Die Stammauswahl ist eine grundlegende Arbeit inZellulaseProduktion, und viele Experten im In- und Ausland haben umfangreiche Forschung durchgeführt. Um qualitativ hochwertigeZellulaseWang Jialin et al. (1996) führten basierend auf in- und ausländischen Erfahrungen nacheinander Trichoderma viride 10, Trichoderma viride Sn-91014, Aspergillus niger NT-15 und Aspergillus niger XX-15A ein. Auf dieser Grundlage wurden physikalische und chemische Mutagenesemethoden wie Ultraviolettstrahlung, spezifische elektromagnetische Wellen, Linearbeschleuniger und Nitrosoguanidin eingesetzt, um die ertragreichen Stämme NT15-H, NT15-H1, XT-15H und XT-15H1 zu erhalten. Die Aktivität von Trichoderma NT-15H in der Festkultur wurde vom Zentrum für Lebensmittelqualitätsüberwachung und -prüfung des Ministeriums für Leichtindustrie am Bahnhof Nanjing getestet. Die Filterpapieraktivität betrug 3670 u/g.Zellulase Die C1-Enzymaktivität betrug 24460u/g undZellulase Die Cx-Enzymaktivität betrug 1800u/g und erreichte damit international Spitzenniveau. Dieser Stamm zeigte eine stabile Leistung in der Fabrikproduktion. Zhang Linghua et al. (1998) verwendeten Trichoderma harzianum W-925, J-931 und erhielten Wu-932Zellulase Stamm mit hoher Enzymaktivität nach kombinierter Mutagenese mit 2% Diethylsulfat und ultravioletter Strahlung (15W, 30cm, 2min). DieZellulase Der Stamm hatte eine CMC-Verzuckerungsleistung von 2975 und eine Filterpapier-Enzymaktivität von 531, die 100 % bzw. 81 % höher waren als beim Ausgangsstamm W-925. Wang Chengshu et al. (1997) vom Feed Additive Technology Service Center des Ministeriums für chemische Industrie verwendeten Trichoderma reesei A3 des Zentrums, um eine UV- und Nitrosoguanidin-Mutagenese durchzuführen. Die behandelten Sporen wurden auf eine Faserdoppelschichtplatte geimpft, 5–8 Tage bei 30 °C kultiviert und 7–10 Tage bei 15 °C belassen. Einzelne Kolonien mit größerem transparenten Kreisdurchmesser und Koloniedurchmesser wurden für die Feststofffermentation in einem Dreieckskolben ausgewählt und anschließend gescreent, um den Stamm Trichoderma reesei 91-3 mit hoherZellulaseAktivität.
DerZellulaseStämme neigen zum Abbau, und ihre Enzymproduktionskapazität nimmt nach dem Abbau deutlich ab. Dafür kann es drei Gründe geben:
①Der durch Mutagenese gescreente Stamm erfährt eine revertante Mutation.
②Natürliche negative Mutation.
③Eine langfristige Lagerung von Bakterienstämmen bei niedrigen Temperaturen kann zum Wachstum von sekundären Hyphen auf den Konidien führen. Die Vitalität der von den sekundären Hyphen gebildeten Konidien ist schwach, was der Hauptgrund für den bakteriellen Abbau sein kann. Um den Abbau vonZellulaseZhang Linghua et al. (1998) berichteten über die Verwendung von Sandröhrchen zur Konservierung der Stämme. Sand und Erde, die gesiebt und gereinigt werden sollen, werden im Verhältnis 3:2 gemischt und in Reagenzgläser gefüllt. Diese werden dreimal 30 Minuten lang mit einem Druck von 1 kg/cm² sterilisiert. Der zu konservierende Bakterienstamm wird in einer 1000 ml Sporensuspension zubereitet. 0,5 ml werden in jedes Sandröhrchen injiziert, gut geschüttelt und in einem Vakuumtrockner mit wasserfreiem CaCl² gelagert. Nach der Prüfung wird derZellulase Die Enzymaktivität blieb innerhalb der 121 Testtage im Wesentlichen unverändert; die Zeit fürZellulase Die Zeitspanne, in der die Enzymaktivität um 50 % abnimmt, wurde von 60 Tagen bei Verwendung herkömmlicher Methoden auf 160 Tage verlängert, wodurch sich die Geschwindigkeit des bakteriellen Abbaus deutlich verlangsamte.
EinflussfaktorenZellulaseAktivität
Der optimale pH-Wert fürZellulaseliegt im Allgemeinen zwischen 4,5 und 6,5. Gluconolacton kann wirksam hemmenZellulase, und Schwermetallionen wie Kupfer- und Quecksilberionen können ebenfalls hemmenZellulase. Cystein kann jedoch ihre hemmende Wirkung aufheben und sogar weiter aktivierenZellulase. Pflanzengewebe enthält natürlicheZellulaseInhibitoren; Es kann Pflanzen vor dem durch Schimmel verursachten Verfall schützen, und diese Inhibitoren sind phenolische Verbindungen. Bei hoher Oxidaseaktivität im Pflanzengewebe kann es phenolische Verbindungen zu Chinonverbindungen oxidieren, die hemmen könnenZellulase.
